羧甲基-β-葡聚糖/壳聚糖纳米颗粒:新型耐热高效的抗原递送载体
在过去的几十年中，纳米技术被出现为旨在提高对现代抗原免疫应答的重要工具。已经显示专门为此目的设计的纳米载体为蛋白质，肽和基于多核苷酸的抗原提供保护，稳定性和控制释放性质。多糖是特别有趣的生物材料，用于在病原体中的广泛分布促进这些纳米载体的构建，这有利于抗原呈递细胞（APC）的识别。在这项工作中，我们专注于免疫刺激性β-葡聚糖衍生物，羧甲基-β-葡聚糖，制备与壳聚糖组合的新型纳米骨架。
得到的羧甲基-β-葡聚糖/壳聚糖纳米颗粒表现出足够的物理化学性质和重要的蛋白质结合效率，具有卵巢作为模型化合物。此外，通过优化抗原负载纳米颗粒的冻干形式来实现热稳定性，该抗原纳米颗粒在40℃下保持稳定稳定。小鼠的生物分布研究表明皮下注射后纳米颗粒的有效排出至最近的淋巴结，以及与树突细胞的显着共定位。另外，用单剂量的卵泡负载的纳米颗粒的皮下免疫小鼠导致诱导T细胞增殖和抗体反应，与用明矾吸附的卵巢达到的抗体反应相当。这些结果说明了这些新型纳米载体在疫苗接种中的潜力。
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Cordeiro，A.S.，Farsakoglu，Y.，Crecente-Campo，J.等等。羧甲基-β-葡聚糖/壳聚糖纳米颗粒:新型耐热高效的抗原递送载体。药物Deliv。和Transl。Res。（2021）.https://doi.org/10.1007/s13346-021-00968-9
材料
药物级壳聚糖盐酸，分子量为47 kDa，脱乙酰度为80-95%，来自德国哈勒Heppe医用壳聚糖有限公司。羧甲基-β葡聚糖,获得酿酒cerevisae并以85%取代度的羧基甲基进行修饰，是Mibelle AG生化公司(Buchs, Switzerland)的一种捐赠。卵清蛋白为完全蛋白，分子量为45 kDa，由Invivogen(法国图卢兹)提供。5-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯(5-TAMRA SE)购自德国柏林emp生物技术有限公司。蔗糖dilaureate (Surfhope®D1216）是由三菱化学食品公司（东京，日本）获得的。蔗糖由Acofarma（马德里，西班牙）和海藻糖（制药等级）购买Pfanstiehl（Waukegan（IL），美国）。聚乙烯吡咯烷酮（PVP，kollidon®25.)购买自巴斯夫（Ludwigshafen，德国）。Squalene是从Merck Millipore（德国达姆施塔特）收购的。山梨糖醇单一食物（跨度®80），从Sigma-Aldrich（Saint Louis，USA）获得了牛血清蛋白和甘氨酸。所有溶剂都是HPLC等级，由Thermo Fisher Scientific（Waltham，USA）或Scharlab SL（西班牙巴塞罗那）提供。