用于管理高度浓缩制剂的蛋白质粘度的赋形剂组合

目的：当通过皮下施用途径交付时，药物的体积仅限于约。2毫升。对于治疗性蛋白质，例如MAb或血浆蛋白，该限制需要使用高蛋白质浓度。如图1所见，一些蛋白质开始以低至100mg / ml的浓度变得高度粘稠。在这种浓度下，可以再延长注射器可能不会迫使制剂。我们探讨赋形剂组合的效果来管理蛋白粘度。

目标：提供最佳级辅料以减少粘度并使患者友好的管理能够。

方法：在其各自的FDA或EMA注册制剂中获得单克隆抗体。

对于赋形剂研究，选择pH7.2的嵌合单克隆抗TNF-α抗体（MABC）。所有辅料和缓冲区组件购自Milliporeigma。

对于缓冲交换和实现高蛋白浓度，我们使用了Amicon®超级4 Ultracell-30k离心过滤器单元。对于赋形剂测试，通过用这些旋转柱以2,000×g离心交换五个曲线瘤。通过在2,000×g的离心中，体积也降低。根据Lambert-Beer的定律和德国Eppendorf，汉堡，德国Eppendorf，汉堡，德国）的280nm确定蛋白质浓度。用相应的缓冲液制备稀释液，并通过相同的方法再次验证。

用m-VROC™粘度计将样品平衡至20°C，剪切速率为1000 - 3000 /s。200 μL的样品装入500 μL的气密注射器(汉密尔顿，雷诺，美国)，在启动步骤后分三次测量。

使用动态光散射（DLS）在Dynapro PRIII（Wyatt Technology，Santa Barbara，USA）上测量粒子扩散DT，每次在25°C时每个采集为5秒。

无限稀释D0的扩散通过在3至14mg / ml mABC的范围内线性地分配扩散来源于等式DT = D0（1+ KD * C）。为了确定扩散相互作用参数Kd，绘制DT / D0给出的归一化形式。