赋形剂对蛋白a层析和病毒灭活的影响

单克隆抗体和Fc融合蛋白的纯化由几个通常作为平台方法操作的单元操作组成，从Protein a层析开始。第一个捕获步骤，随后的低pH值病毒灭活，以及随后的离子交换层析步骤主要能够去除任何杂质，如宿主细胞蛋白质、聚集物和病毒。在这些步骤中pH值和电导率的变化可能会导致额外的不需要的产物物种，如聚集体。

突出了

•PEG4000可减少蛋白A色谱中单抗洗脱时的峰前沿。

•改进了PEG调节的线性pH梯度洗脱对宿主细胞蛋白的去除。

•通过添加多元醇和糖可以降低低pH保持阶段的聚集。

•赋形剂不损害病毒灭活或与CEX结合。

本研究以多元醇等具有稳定作用的辅料作为缓冲系统添加剂，研究其在Protein A层析、低pH病毒灭活、阳离子交换层析过程中对几个方面的影响。结果表明，赋形剂，比如钉4000，影响抗体洗脱行为，以及在ph梯度设置下宿主细胞蛋白洗脱行为。

糖赋形剂，如蔗糖，稳定抗体在低pH值的病毒灭活。所有测试的辅料在随后的阳离子交换层析步骤中对病毒灭活和动态结合能力没有负面影响。该研究表明，赋形剂和赋形剂组合可以在不损害后续加工步骤的情况下对纯化产生有益的影响。继续阅读这里

文章信息:Carolin Stange, Supriyadi Hafiz, Christoph Korpus, Romas Skudas, Christian Frech，辅料在蛋白a层析和病毒灭活中的影响，色谱B杂志，2021,122848,https://doi.org/10.1016/j.jchromb.2021.122848