蛋白质中蛋白质的影响和病毒失活的影响
单克隆抗体和Fc融合蛋白的纯化通常是作为平台方法进行的几个单元操作，首先是Protein a色谱。第一个捕获步骤，接下来的低pH病毒失活，以及随后的离子交换色谱步骤大多能够去除任何杂质，如宿主细胞蛋白质、聚集物和病毒。在这些步骤中pH值和电导率的变化可能会导致额外的不需要的产品种类，如聚集体。
突出了
- •在Protein A色谱中，PEG4000降低了mAb洗脱过程中的峰前。
- •改进PEG调节线性pH梯度洗脱对宿主细胞蛋白的去除。
- •通过添加多元醇和糖，可以减少低pH保持阶段的聚集。
- •赋形剂不破坏病毒失活或与CEX结合。
本研究以多元醇等具有稳定能力的赋形剂作为缓冲体系添加剂，研究其在Protein A色谱、低pH病毒灭活、阳离子交换色谱等过程中对几个方面的影响。结果表明，赋形剂挂钩4000，影响抗体洗脱行为，以及pH梯度设置中的宿主细胞蛋白质洗脱行为。
糖赋形剂，如蔗糖，稳定抗体在低pH病毒失活。在随后的阳离子交换色谱步骤中，所有测试的赋形剂均未显示对病毒失活和动态结合能力的负面影响。这项研究表明，赋形剂和赋形剂组合，可以在不损害后续加工步骤的情况下对纯化有有益的作用。继续阅读这里
文章信息:Carolin Stange, Supriyadi Hafiz, Christoph Korpus, Romas Skudas, Christian french，辅料在Protein a色谱和病毒失活中的影响，色谱B杂志，2021,122848,https://doi.org/10.1016/j.jchromb.2021.122848