干燥方法和辅料对蛋白质固体结构和物理稳定性的影响:冷冻干燥vs.喷雾冷冻干燥

本研究旨在确定干燥方法和赋形剂对模型蛋白固体结构和物理稳定性的影响。采用冷冻干燥或喷雾冷冻干燥(SFD)生产含两种模型蛋白(溶菌酶或肌红蛋白)之一的蛋白固体，添加或不添加辅料(蔗糖或甘露醇)。采用固态傅里叶变换红外光谱(ssFTIR)、差示扫描量热(DSC)、圆二色光谱(CD)、尺寸排阻色谱(SEC)、BET比表面积测定和固态氢氘交换质谱(ssHDX-MS)对蛋白质粉末进行表征。ssFTIR和CD可以鉴定出配方中蛋白质的结构几乎没有差异。ssHDX-MS能够识别种群的异质性，这是传统的ssFTIR和cd表征技术无法检测到的_马克斯在对溶菌酶在40°C下进行的90天稳定性研究中，峰面积与蛋白质物理不稳定性(通过尺寸排除色谱失去单体峰面积)有良好的相关性。与纯肌红蛋白配方相比，肌红蛋白-甘露醇配方的比表面积越大，单体含量损失越大。通过对配方的优化，喷雾冷冻干燥是一种可行的制备蛋白质固体的技术。在本研究中，使用ssHDX-MS、BET表面积测量和SEC观察到的配方和工艺之间的差异，为了解干燥方法和赋形剂对蛋白质物理稳定性的影响提供了见解。继续阅读干燥方法和赋形剂对蛋白质固体的影响