单克隆抗体粉磨过程中蛋白质亚可见颗粒的形成

我们观察到一个有趣的现象，即将冻干的单克隆抗体X (mAb-X)配方粉末研磨后，在重组液中产生了显著的蛋白质亚可见颗粒(sbvp)，这只能通过MFI和DLS等敏感的颗粒分析方法观察到。

研究了粉碎温度、自由基清除剂甲硫氨酸和3-氨甲酰-2,2,5,5-四甲基-1-吡咯烷氧基自由基(CTPO)对sbvp形成的影响。通过EPR观察自由基的含量，并与研磨前样品温度相关。蛋氨酸和cpo可部分抑制sbvp的形成。sbvp形成的数量取决于粉碎前自由基的数量/样品温度。

在更高的温度下，会形成更多的自由基和sbvp。除了之前已知的机械研磨过程中高温形成的蛋白质降解，我们还提出了一种未报道的补充机制，即自由基的形成(即由于C整个C-S键)在机械研磨时处于干燥状态，导致重组溶液中形成蛋白质颗粒。我们的观察表明，应避免机械研磨蛋白粉或谨慎使用(即研磨温度、强度和时间)，并充分评估其对自由基和颗粒形成的影响。更多关于单克隆抗体粉末研磨过程中蛋白质亚可见颗粒的形成