Carboxymethyl-β-葡聚糖/壳聚糖纳米粒子：用于抗原输送的新型恒温和高效载体

在过去的几十年里，纳米技术已经成为一种重要的工具，旨在增强对现代抗原的免疫反应。专门为此目的设计的纳米载体已被证明可为蛋白质、肽和基于多核苷酸的抗原提供保护、稳定性和控释特性。由于多糖广泛分布于病原体中，有助于抗原呈递细胞（APCs）对其进行识别，因此多糖是构建这些纳米载体的重要生物材料。在这项工作中，我们重点研究了免疫刺激剂β-葡聚糖衍生物羧甲基-β-葡聚糖，以制备与壳聚糖结合的新型纳米载体。

产生的羧甲基-β-葡聚糖/壳聚糖以卵清蛋白为模型化合物，纳米粒表现出良好的物理化学性质和重要的蛋白质缔合效率。此外，通过优化冻干形式的载抗原纳米粒实现了热稳定性，其在40℃下保持稳定达1个月。在小鼠体内的生物分布研究表明，皮下注射纳米颗粒后，纳米颗粒能有效地引流到最近的淋巴结，并与树突状细胞显著共定位。此外，单剂量卵清蛋白纳米粒皮下免疫小鼠可诱导T细胞增殖和抗体反应，与明矾吸附的卵清蛋白相当。这些结果说明了这些新型纳米载体在疫苗接种中的潜力。

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Cordeiro，A.S.，Farsakoglu，Y.，Crecente Campo，J。等羧甲基-β-葡聚糖/壳聚糖纳米粒子：用于抗原递送的新型恒温和有效载体。毒品混合。并翻译。res。（2021）。https://doi.org/10.1007/S13346-021-00968-9.

材料

药品级壳聚糖Heppe Medical Chitosan GmbH（Halle，Germany）中获得了盐酸分子量为47kDa和80-95％的脱乙酰化程度。羧甲基-β-葡聚糖，得到的酿酒酵母酿酒酵母并以85％的替代度与羧甲基进行修饰，是来自Mibelle Ag生物化学（Buchs，瑞士）的含良好捐赠。卵磷蛋白，以分子量为45kDa的完全蛋白质的形式，由InvivoLON（Froulouse）提供。从EMP Biotech GmbH（德国柏林）收购了5-羧甲特四甲基 - 罗丹明琥珀酰亚胺酯（5-Tamra SE）。蔗糖Dilakee（Surfhope^®D1216）从三菱化学食品公司（日本东京）获得。蔗糖从Acofarma（西班牙马德里）购买，海藻糖（医药级）从pfanstiehl.（沃基根（伊利诺伊州），美国）。聚乙烯吡咯烷酮（PVP），科利顿^®25）购自巴斯夫（德国路德维希港）。角鲨烯是从默克密理博公司（德国达姆施塔特）收购的。山梨醇酐单油酸酯（Span^®80），牛血清白蛋白和甘氨酸从Sigma-Aldrich（美国圣路易斯）获得。所有溶剂均为高效液相色谱级，由赛默飞世尔科技公司（美国沃尔瑟姆）或Scharlab SL公司（西班牙巴塞罗那）提供。