单克隆抗体粉磨过程中蛋白质亚可见颗粒的形成

我们观察到一个有趣的现象，即冷冻干燥的单克隆抗体X（mAb-X）配方粉末研磨后，在重组液中产生显著的蛋白质亚可见颗粒（SbVPs），这只能通过敏感的颗粒分析方法（如MFI和DLS）观察到。

考察了研磨温度、自由基清除剂甲硫氨酸和3-氨甲酰-2,2,5,5-四甲基-1-吡咯烷氧基自由基（CTPO）对SbVPs形成的影响。用电子顺磁共振（EPR）观察了样品的自由基含量，并与研磨前的样品温度有关。蛋氨酸和CTPO可部分抑制SbVPs的形成。形成的SBVP的量取决于研磨前自由基的量/样品温度。

在更高的温度下，更多的自由基和SBVP形成。除了先前已知的由于机械研磨过程中形成的高温导致的蛋白质降解之外，我们提出了一种未报道的补充机制，即自由基的形成（即由于C-奥尔C-S键）在机械研磨过程中处于干燥状态，导致重组溶液中形成蛋白质颗粒。我们的观察结果表明，蛋白质粉的机械研磨应避免或谨慎使用（即研磨温度、强度和时间），并应充分评估对自由基和颗粒形成的影响。单克隆抗体粉磨过程中蛋白质亚可见颗粒形成的再认识